หลักการสังเคราะห์กรดนิวคลีอิก

การสังเคราะห์กรดนิวคลีอิกดำเนินการโดยใช้วิธีไตรกลีเซอไรด์เฟสของแข็ง sialic amide โดยที่ปลาย 3′ ของ DNA จะถูกตรึงไว้บนสารตั้งต้นที่เป็นเฟสของแข็ง และนิวคลีโอไทด์จะถูกเติมในทิศทาง 3′ ถึง 5′ จนกระทั่งชิ้นส่วน DNA ที่ต้องการถูกสังเคราะห์ .สิ่งนี้แตกต่างจากการสังเคราะห์ DNA โดยการใช้ DNA polymerase

ปลาย 3′ ของฐานแรกถูกตรึงบน CPG ในระหว่างการสังเคราะห์ 5′-OH ของฐานถัดไปได้รับการป้องกันด้วย di-p-tolyl trityl DMT หมู่อะมิโนบนฐานได้รับการปกป้องด้วยกรดเบนโซอิก และ 3′ -OH จากนั้นจะถูกกระตุ้นด้วยสารประกอบอะมิโนฟอสเฟต1 เบสของ 5 5′-OH ของ 1 เบสและ 3′-OH ของเบสถัดไปจะเกิดไตรกลีเซอไรด์ฟอสไฟต์ ซึ่งจากนั้นจะถูกออกซิไดซ์ด้วยไอโอดีนเป็นไตรกลีเซอไรด์ฟอสเฟต ตัวป้องกันบนฐานที่สอง 5′-OH จะถูกกำจัดออกโดย การเติมกรดไดคลอโรอะซิติกรอบ DM ผ่านการเติมเบสถัดไปและหลังจากการสังเคราะห์สารป้องกันบน 5′-OH จะถูกลบออกด้วยกรดอ่อน ชิ้นส่วนจะถูกตัดการเชื่อมต่อจากเรซินแข็งด้วยแอมโมเนียมไฮดรอกไซด์เข้มข้น สารป้องกันจะถูกลบออกจากฐาน ด้วยแอมโมเนียมไฮดรอกไซด์เข้มข้นภายใต้ความร้อน แอมโมเนียมไฮดรอกไซด์จะถูกกำจัดออก ชิ้นส่วนจะถูกทำให้แห้งแบบสุญญากาศ และกรดนิวคลีอิกจะถูกทำให้บริสุทธิ์โดยโครมาโตกราฟีของเหลวหรือ PAGE

ขั้นตอนการสังเคราะห์โอลิโก

กำลังปลดบล็อก

ที่กลุ่มการป้องกัน DMT 5 ปลายจะถูกลบออกโดยการเพิ่มโซลูชัน TCA

การเปิดใช้งาน

การผสมแอคติเวเตอร์กับโมโนเมอร์โอลิโกนิวคลีโอไทด์เพื่อสร้างโมโนเมอร์โอลิโกนิวคลีโอไทด์ที่แอคทีฟ

การมีเพศสัมพันธ์

หมู่ไฮดรอกซิลที่มี 5 ขั้วทำปฏิกิริยากับโอลิโกนิวคลีโอไทด์ที่เป็นสื่อกลางในปฏิกิริยาควบแน่นแบบต้านการกำเนิด เพื่อสร้างพันธะฟอสไฟต์ไตรกลีเซอไรด์ที่ไม่เสถียร

การกำหนดสูงสุด 

การเติมสารปิดฝาจะทำปฏิกิริยาปิดฝาอะซิติเลชั่นกับหมู่ไฮดรอกซิลส่วนเกินที่ไม่เกี่ยวข้องกับปฏิกิริยาควบแน่น

ออกซิเดชัน 

การเติมสารละลายไอโอดีนที่มีน้ำจะทำปฏิกิริยากับพันธะฟอสไฟต์ที่ไม่เสถียรโดยการเกิดออกซิเดชันเพื่อสร้างพันธะไตรกลีเซอไรด์ของกรดฟอสฟอริกที่เสถียร

ความแตกแยกของไซยาโนเอทิล

ผลิตภัณฑ์กรดนิวคลีอิกหลังจากการสังเคราะห์ ด้วยการเติมสารละลาย DEA เพื่อกำจัดกลุ่มไซยาโนเอทิลออกจากพันธะไตรกลีเซอไรด์ฟอสเฟต

การแยกและการปลดการป้องกัน

เศษกรดนิวคลีอิกจะถูกแยกออกจากตัวพาที่เป็นของแข็งโดยการเติมสารละลายแอมโมเนียมไฮดรอกไซด์เข้มข้น จากนั้นให้ความร้อนเพื่อกำจัดหมู่ปกป้องออกจากพันธะไฮโดรเจนของเบส