ปัจจัยที่กำหนดประสิทธิภาพการสังเคราะห์ดีเอ็นเอ

ในการสังเคราะห์ DNA, RNA และการสังเคราะห์กรดนิวคลีอิกที่ไม่เป็นไปตามธรรมชาติทั่วไปนั้น ขั้นตอน Deprotection and Coupling มีบทบาทสำคัญอย่างยิ่ง

ขั้นตอนการกำจัดการป้องกันคือการกำจัดกลุ่ม DMT บนส่วนรองรับที่เป็นของแข็งหรือกลุ่มไฮดรอกซิล 5' บนนิวคลีโอไซด์ก่อนหน้าด้วยกรดอินทรีย์ และสัมผัสกลุ่มไฮดรอกซิลสำหรับขั้นตอนการต่อพ่วงต่อไปนี้กรดไตรคลอโรอะซีติก 3% ในไดคลอโรมีเทนหรือโทลูอีนส่วนใหญ่จะใช้เพื่อดำเนินการตามขั้นตอนการขจัดการป้องกันความเข้มข้นของกรดไตรคลอโรอะซิติกและเวลาการขจัดสิ่งกีดขวาง (เวลาการชะล้างสิ่งอุดตัน) มีอิทธิพลเหนือความบริสุทธิ์ของผลิตภัณฑ์ขั้นสุดท้ายความเข้มข้นต่ำและเวลาการคลายบล็อกไม่เพียงพอทำให้กลุ่ม DMT ที่ไม่ได้ทำปฏิกิริยา ซึ่งลดผลผลิตและเพิ่มสิ่งเจือปนที่ไม่ต้องการเวลาในการคลายบล็อกที่ยาวนานอาจทำให้ลำดับพิวรีนที่สังเคราะห์ไว้ลดลง ก่อให้เกิดสิ่งเจือปนที่ไม่คาดคิด

ขั้นตอนการเชื่อมต่อไวต่อปริมาณน้ำของตัวทำละลายและความชื้นในอากาศความเข้มข้นของน้ำในการสังเคราะห์ควรน้อยกว่า 40 ppm ดีกว่าน้อยกว่า 25 ppmเพื่อรักษาสภาพการสังเคราะห์แบบปราศจากน้ำ การสังเคราะห์กรดนิวคลีอิกควรดำเนินการในสภาพแวดล้อมที่มีความชื้นต่ำ ดังนั้นเราขอแนะนำให้ลูกค้าของเราใช้Amidites อุปกรณ์ละลายซึ่งสามารถละลายฟอสโฟรามิไดต์ที่เป็นผงหรือเป็นน้ำมันในอะซิโตไนไตรล์ปราศจากน้ำเพื่อหลีกเลี่ยงไม่ให้สัมผัสกับอากาศ

ปัจจัยที่กำหนดประสิทธิภาพการสังเคราะห์ DNA5
ปัจจัยที่กำหนดประสิทธิภาพการสังเคราะห์ DNA4

เนื่องจากการละลายของฟอสโฟรามิไดต์จะดีกว่าในสถานการณ์ที่ไม่ใช่น้ำ และกับดักโมเลกุลเพื่อดูดซับน้ำที่ติดตามในรีเอเจนต์และอะมิไดต์ จึงจำเป็นต้องเตรียมกับดักโมเลกุล.เราแนะนำให้ใช้ตะแกรงรอง 2 กรัมสำหรับขวดน้ำยา 50-250 มล., 5 กรัมสำหรับขวดน้ำยา 250-500 มล., 10 กรัมสำหรับขวดน้ำยา 500-1,000 มล. และ 20 กรัมสำหรับขวดน้ำยา 1,000-2,000 มล.

การละลายของฟอสฟอรามิไดต์ควรดำเนินการภายใต้บรรยากาศเฉื่อย และการเปลี่ยนสารกระตุ้นปฏิกิริยาและอะซิโตไนไตรล์ควรเสร็จสิ้นทันเวลารีเอเจนต์ Capping และ Oxidation ควรใช้โดยเร็วที่สุด รีเอเจนต์ที่เปิดอยู่จะทำให้อายุการเก็บรักษาน้อยลง และกิจกรรมระหว่างการสังเคราะห์น้อยลง


เวลาโพสต์: ส.ค.-09-2565